微生物論文精品(七篇)

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篇(1)

論文關(guān)鍵詞：測(cè)試瓶法，細(xì)菌總數(shù)，景觀水

景觀水常規(guī)水質(zhì)檢測(cè)指標(biāo)主要包括CODCr、NH3-N、TP、BOD、葉綠素-a、濁度、透明度、水溫、細(xì)菌總數(shù)等多項(xiàng)。微生物指標(biāo)能夠顯示水體的不同污染程度，在水體修復(fù)過(guò)程中有重要參考價(jià)值。本試驗(yàn)以景觀河道等水樣為主要檢測(cè)對(duì)象，考察細(xì)菌總數(shù)指標(biāo)，選取合適的分析方法，并在一定程度上反映受污染水體在生物修復(fù)過(guò)程中微生物的含量變化。

目前細(xì)菌總數(shù)的主要測(cè)定方法有平皿計(jì)數(shù)法、最可幾率法（MPN）、光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)法、熒光顯微鏡計(jì)數(shù)法、渾濁度計(jì)數(shù)法、電阻抗法等[1]。其中成本較低且廣泛應(yīng)用于水中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定的為平皿計(jì)數(shù)法和MPN法。平皿計(jì)數(shù)法操作繁瑣，全程需無(wú)菌條件，環(huán)境及人為因素對(duì)測(cè)定結(jié)果影響較大；MPN法操作相對(duì)簡(jiǎn)便，二者對(duì)于現(xiàn)場(chǎng)取樣的景觀水體均存在不能在野外現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行快速檢測(cè)的缺點(diǎn)。而同樣采用絕跡稀釋法原理制備的測(cè)試瓶法制作簡(jiǎn)單，攜帶方便，能夠于取樣現(xiàn)場(chǎng)操作。測(cè)試瓶可提前數(shù)天大量制備，隨時(shí)取用生物論文，避免了一般測(cè)試方法冗長(zhǎng)的準(zhǔn)備時(shí)間。該法原用于石油天然氣行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的油田注入水細(xì)菌分析（SY/T 0532-93），已經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)道，采用不同培養(yǎng)基制成的針對(duì)冷卻水中硫酸鹽還原菌[2]、鐵細(xì)菌[3]，以及產(chǎn)表面活性劑菌[4]、黃原膠降解菌[5]等不同菌種的測(cè)試瓶，經(jīng)驗(yàn)證與MPN法測(cè)定結(jié)果完全或接近一致。

1 試驗(yàn)方法

1.1 測(cè)試瓶的制備

在水體表層光線穿透的地方存活有藻類和光合細(xì)菌，制造氧氣，因此有氧淺水層生活著大量的好氧細(xì)菌，氧氣濃度較低的水層主要是兼氧細(xì)菌，只有在深水層和底泥中有各種厭氧細(xì)菌。河道、湖泊等景觀水取樣時(shí)一般在表層深約0.3-0.5 m處，主要含好氧細(xì)菌，培養(yǎng)基的選擇以培養(yǎng)好氧菌為主免費(fèi)論文。

參考平皿計(jì)數(shù)法中培養(yǎng)細(xì)菌所用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基[6]，除去起固化作用的瓊脂組分制成液態(tài)培養(yǎng)基。由于沒(méi)有一種單獨(dú)的培養(yǎng)基能夠滿足某一水樣中所有種類細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生理?xiàng)l件，因此該培養(yǎng)基培養(yǎng)所測(cè)得的細(xì)菌總數(shù)實(shí)際上要小于被測(cè)水樣中真正存在的細(xì)菌數(shù)目，且培養(yǎng)獲得的應(yīng)為活菌總數(shù)。

取牛肉膏 3 g，蛋白胨 10 g，NaCl 5 g，用10% NaOH 調(diào)整pH至7.0-7.2，溶于1000 mL水中，若有渾濁可過(guò)濾。選取容量約12 mL的細(xì)菌培養(yǎng)瓶，用定量加液器注入9 mL液體培養(yǎng)基，橡膠蓋鋁箔密封后在121±1℃下滅菌半小時(shí)。

1.2 測(cè)試方法

粗略估計(jì)待測(cè)樣的細(xì)菌總數(shù)，選取合適的測(cè)試瓶數(shù)量并編號(hào)，可同時(shí)測(cè)定平行樣。用無(wú)菌注射器取1 mL待測(cè)樣生物論文，注入1號(hào)瓶，搖勻得1:10稀釋濃度；另取一支無(wú)菌注射器從1號(hào)瓶?jī)?nèi)取1 mL液體注入2號(hào)瓶，搖勻得1:100稀釋濃度；取第三支無(wú)菌注射器從2號(hào)瓶?jī)?nèi)取1 mL液體注入3號(hào)瓶，搖勻得1:1000稀釋濃度，以此類推，根據(jù)需要而重復(fù)取樣稀釋過(guò)程。將培養(yǎng)瓶置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

圖1 測(cè)試瓶法示意圖

Fig.1 Test-bottle Schematic

培養(yǎng)完畢后觀察，培養(yǎng)液成云狀渾濁則表示有細(xì)菌生成。1號(hào)瓶有細(xì)菌生成則細(xì)菌總數(shù)為1-10個(gè)/mL；2號(hào)瓶有細(xì)菌生成則細(xì)菌總數(shù)為10-102個(gè)/mL。直至第n個(gè)測(cè)試瓶出現(xiàn)渾濁，而第n+1個(gè)測(cè)試瓶中培養(yǎng)基仍保持澄清狀態(tài)，則細(xì)菌總數(shù)為10n-1-10n個(gè)/mL，由此可得樣品中最大可能細(xì)菌總數(shù)。若要得到更準(zhǔn)確的結(jié)果，可進(jìn)行平行試驗(yàn)，以相應(yīng)的數(shù)量指標(biāo)查計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)表[7, 8]得到細(xì)菌總數(shù)的近似值。

2 測(cè)試結(jié)果分析

2.1測(cè)試瓶法培養(yǎng)時(shí)間的確定

平皿計(jì)數(shù)法中細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間為37℃恒溫下24 h，MPN法及文獻(xiàn)報(bào)道的測(cè)試瓶法中根據(jù)測(cè)試菌種的不同而確定7-15d的培養(yǎng)時(shí)間。選取4組不同水樣，每組6個(gè)不同稀釋度，每天觀察每組樣品中出現(xiàn)渾濁的測(cè)試瓶個(gè)數(shù)，直至結(jié)果保持穩(wěn)定。

由表1可知，接種后的1-2 d，細(xì)菌處于生長(zhǎng)階段，第3天直至第7天內(nèi)不再有新的測(cè)試瓶出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，即細(xì)菌總數(shù)不再發(fā)生變化，故可認(rèn)為培養(yǎng)時(shí)間為1-2 d。在實(shí)際操作中，相比于其他需要數(shù)天長(zhǎng)期培養(yǎng)觀察的方法大幅度縮短時(shí)間，更適宜于實(shí)際應(yīng)用生物論文，可更好的針對(duì)現(xiàn)象及時(shí)采取處理措施，獲得最佳效果。

表1 培養(yǎng)時(shí)間分析結(jié)果

Tab.1 Culture Time Analysis

試驗(yàn)序號(hào)

出現(xiàn)渾濁的測(cè)試瓶數(shù)/個(gè)

穩(wěn)定期/d

1 d

2 d

3 d

4 d

5 d

6 d

7 d

1

4

5

5

5

5

5

5

2

2

4

5

5

5

5

5

5

2

3

2

4

4

4

4

4

4

2

4

3

3

3

3

3

3