生物醫(yī)用材料的基本要求精品(七篇)

序論：寫作是一種深度的自我表達(dá)。它要求我們深入探索自己的思想和情感，挖掘那些隱藏在內(nèi)心深處的真相，好投稿為您帶來了七篇生物醫(yī)用材料的基本要求范文，愿它們成為您寫作過程中的靈感催化劑，助力您的創(chuàng)作。

篇(1)

【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞毒性;骨水泥;組織相容性;MTT法

骨粘固劑，常用名為骨水泥，其主要成分是聚甲基丙烯酸甲酯。1951年，瑞典Klaer用PMMA作為髖關(guān)節(jié)假體固定材料;1988年Charnley深入研究并推廣使用，從而使骨粘固劑固定假體置換獲得成功;我國從1978年研制成功并應(yīng)用與臨床，主要用于人工關(guān)節(jié)置換手術(shù)。應(yīng)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的活性是近年來評(píng)價(jià)生物相容性的一種簡便、高效的方法。本試驗(yàn)旨在通過對(duì)兩種國產(chǎn)骨水泥的細(xì)胞毒性試驗(yàn)的研究，闡述其應(yīng)用的安全性。

1.試驗(yàn)材料 1.1 實(shí)驗(yàn)材料和對(duì)照品

試驗(yàn)選取某國產(chǎn)骨水泥及同廠家?guī)c大霉素的骨水泥。骨水泥的組成為：粉劑20g（聚甲基丙烯酸甲酯 17.60g，硫酸鋇2.00g，過氧化苯甲酰0.40g）;液體 10ml（甲基丙烯酸甲酯 9.87ml，對(duì)苯二酚 75ppm，N，N二甲基對(duì)甲苯胺

供試品的制備：室溫下，在無菌條件下將粉劑倒入骨水泥攪拌器中，然后將液體倒入粉劑中，充分?jǐn)嚢杓s1.5min，混合均勻后等待3-5分鐘后放入樣品容器。稱取兩種骨水泥的重量，按照0.2g/ml的浸提比例，加含10%血清的MEM培養(yǎng)基為浸提介質(zhì)，制成浸提原液。陰性對(duì)照組：按照6cm2/ml的比例，取24cm2高密度聚乙烯，加4.00mL浸提介質(zhì)。陽性對(duì)照組含5% DMSO的浸提介質(zhì)。 1.2 菌株和細(xì)胞

小鼠成纖維細(xì)胞，購自中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫（NCTC clone-929）。

1.3培養(yǎng)基及試劑

胎牛血清（Gibco公司）10%;MEM培養(yǎng)基干粉（Gibco公司）配置成原液;四唑鹽（MTT）生工生物工程（上海）有限公司5g/L ;二甲基亞砜（DMSO）Merck公司5% ;胰酶溶液（Gibco公司）0.25% ;雙抗（10000U/mL）Gibco公司1%。

2.試驗(yàn)方法

細(xì)胞毒性試驗(yàn)―MTT法[2，3]

2.1 在無菌的條件下，取供試樣品制備浸提液。分別取供試品骨水泥及慶大霉素骨水泥4g，按照0.2g/ml的浸提比例，加浸提介質(zhì)20mL，制成浸提原液。

陰性對(duì)照組：按照6cm2/ml的比例，取24cm2高密度聚乙烯，加4.00mL浸提介質(zhì)。

陽性對(duì)照組： 含5% DMSO的浸提介質(zhì)。浸提溫度為37℃，浸提時(shí)間為24 h。

2.2 接種細(xì)胞：將傳代48～72h生長旺盛的細(xì)胞，經(jīng)2.5g/L胰酶溶液消化制成濃度為 1×104 個(gè)/mL的細(xì)胞懸液接種于96孔板，設(shè)空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和供試品浸提原液組，每組均為12孔，每孔接種100?L細(xì)胞懸液，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h。

換液培養(yǎng)：24h后，棄去原培養(yǎng)液，空白組加入細(xì)胞培養(yǎng)液，陰性對(duì)照組加入高密度聚乙烯浸提液，陽性對(duì)照組加入含5%DMSO的培養(yǎng)液，供試品組加入浸提原液，每孔100?L，置37℃、5%CO2氣體培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng) 72 h。結(jié)果測(cè)定：經(jīng)接觸培養(yǎng)后，置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。每孔加入20?L質(zhì)量濃度為5g/L MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4h后棄去孔內(nèi)液體，加入150?L DMSO，置振蕩器上振蕩10min，在酶標(biāo)儀570nm和630nm波長下測(cè)定吸光度。

3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及試驗(yàn)結(jié)果：

3.1空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、供試品浸提原液組及陽性對(duì)照組的吸光度采用雙波長法測(cè)定（570nm-630nm）。

3.2計(jì)算公式：相對(duì)增殖率（RGR）=試驗(yàn)樣品組吸光度/空白對(duì)照組吸光度×100% 3.3結(jié)果評(píng)定： 按照GB-T/14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第二部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法的細(xì)胞相對(duì)增殖率分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)作為判定依據(jù)。

陰性對(duì)照的反應(yīng)不大于1級(jí)，陽性對(duì)照組至少為3級(jí)反應(yīng)。如陰性對(duì)照和陽性對(duì)照組反應(yīng)不成立時(shí)應(yīng)重新試驗(yàn)。

4.試驗(yàn)結(jié)果

MTT比色法結(jié)果如下：

根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行結(jié)果分級(jí)：慶大霉素骨水泥的細(xì)胞相對(duì)增殖度為2級(jí)（74.1%），骨水泥的細(xì)胞相對(duì)增殖度為2級(jí)（61.4%）。結(jié)果判定為：反應(yīng)觀察至多50%的細(xì)胞呈圓形，無胞漿內(nèi)顆粒;明顯可見細(xì)胞溶解和細(xì)胞間空區(qū)。

按照GB/T 14233.2-2005檢驗(yàn)醫(yī)療器械時(shí)，一般認(rèn)為可接受的細(xì)胞毒性反應(yīng)為不大于2級(jí)。

5.討論

骨水泥需要長期與人體骨組織接觸， 其組織相容性的優(yōu)劣直接影響臨床療效，對(duì)骨水泥的生物安全性研究主要是按照ISO10993標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的生物安全性評(píng)價(jià)方法進(jìn)行的，按照GB/T 16886.3的要求，作為植入類材料骨水泥必須按照相關(guān)安全性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行完整生物學(xué)評(píng)價(jià)[1-3]。其中體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)材料生物相容性最基礎(chǔ)、最經(jīng)濟(jì)便利的步驟。它可以快速、方便地了解細(xì)胞和受試材料接觸后發(fā)生的生長抑制、死亡等反應(yīng)，在評(píng)價(jià)生物相容性方面得到廣泛認(rèn)同。

在本次試驗(yàn)中，浸提原液中含慶大霉素的骨水泥及不含抗生素的骨水泥都表現(xiàn)出輕微細(xì)胞毒性，50%稀釋液都為極輕的細(xì)胞毒性，均在GB-T 14233.2-2005的可接受范圍內(nèi)。由于MMA單體是造成細(xì)胞毒性的主要因素[4]，所以在制備骨水泥的過程中一定要注意攪拌均勻，充分放熱后再進(jìn)行浸提，以免影響試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。本試驗(yàn)表明抗生素對(duì)骨水泥的細(xì)胞毒性并沒有產(chǎn)生太大的影響，兩種骨水泥與細(xì)胞的相容性較好，符合生物醫(yī)用材料的基本要求[3]。

參考文獻(xiàn)：

[1]醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)[S].第5部分：體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)，2003

[2]醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法[S].第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法，2005