醫(yī)學(xué)技術(shù)論文精品(七篇)

序論：寫作是一種深度的自我表達(dá)。它要求我們深入探索自己的思想和情感，挖掘那些隱藏在內(nèi)心深處的真相，好投稿為您帶來了七篇醫(yī)學(xué)技術(shù)論文范文，愿它們成為您寫作過程中的靈感催化劑，助力您的創(chuàng)作。

篇(1)

優(yōu)勢和特點(diǎn)

1)親和力高、特異性強(qiáng)。適配體與靶標(biāo)之間，憑借彼此互補(bǔ)的三維結(jié)構(gòu)，相互作用后形成牢固穩(wěn)定的復(fù)合物，其解離常數(shù)通常能達(dá)到pmol/L～nmol/L的水平，并且能分辨出靶標(biāo)結(jié)構(gòu)上細(xì)微的差別。

2)庫容量大，識(shí)別范圍廣泛。SELEX技術(shù)的靶標(biāo)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于經(jīng)典的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，除了有蛋白質(zhì)、核苷酸分子外，還可以是糖類、氨基酸、維生素、抗生素、金屬離子、有機(jī)染料，甚至可以是細(xì)菌、病毒、寄生蟲等完整的細(xì)胞或組織，幾乎囊括了自然界中的全部物質(zhì)。

3)合成容易，獲得方便，易于修飾。適配體的體積比傳統(tǒng)抗體小，篩選過程簡便、周期短，對實(shí)驗(yàn)室的要求不高，并具備自動(dòng)化控制的巨大潛力。經(jīng)過化學(xué)合成和修飾以后可保持原生物活性不變，還可以增強(qiáng)其穩(wěn)定性并增加其他新的化學(xué)性質(zhì)，參加多類反應(yīng)。標(biāo)記了熒光、生物素和納米金顆粒之后，發(fā)展出了諸如分子成像技術(shù)等疾病診斷新方法。

4)重復(fù)性好，純度高。整個(gè)篩選和制備的過程在人為控制之下，所得到的適配體幾乎沒有生產(chǎn)批次之間的差異，便于日后的大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用。的化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定，不易降解，對溫度不敏感，保存時(shí)間長，即使變形也能在很短的時(shí)間內(nèi)復(fù)性，利于室溫下運(yùn)輸。

5)分子量小、穩(wěn)定性高。相對于抗體或酶，適配體的化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定，不易降解，對溫度不敏感，保存時(shí)間長，即使變形也能在很短的時(shí)間內(nèi)復(fù)性，利于室溫下運(yùn)輸。

6)應(yīng)用便捷。SELEX技術(shù)所獲得的適配體又被稱作是核酸型抗體，其優(yōu)于傳統(tǒng)抗體的性質(zhì)是沒有免疫原性，因此便能獲得一些低免疫原性甚至無免疫原性靶分子的適配體。并且還省去了傳統(tǒng)抗體制備過程中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，而直接從體外文庫中獲取。而且適配體更容易通過細(xì)胞膜，并且沒有毒性，利于檢測細(xì)胞內(nèi)的靶分子和實(shí)現(xiàn)多層次的調(diào)控，并能較快地被機(jī)體清除代謝掉，經(jīng)過特定的化學(xué)修飾后，還可使半衰期延長，穩(wěn)定性提高，便于科學(xué)研究和疾病診治。

2SELEX技術(shù)的發(fā)展

目前SELEX技術(shù)出現(xiàn)了一些新的篩選方法，越來越多的與各種標(biāo)靶相對應(yīng)的適配體被篩選出來。如毛細(xì)管電泳法、硝酸纖維素膜過濾法、磁珠分離法、親和色譜法、Non-SELEX技術(shù)、無引物PCR-SELEX技術(shù)、微流體SELEX技術(shù)、生物芯片SELEX技術(shù)、原子力顯微鏡等各種新的模式也被應(yīng)用到適配體的篩選中。同時(shí)還出現(xiàn)了SELEX技術(shù)與定量PCR，SEL-EX技術(shù)與流式細(xì)胞儀、SELEX技術(shù)與ELISA的聯(lián)合應(yīng)用，更是極大的提升了篩選的效率和準(zhǔn)確性。

2．1消減SELEX技術(shù)消減

SELEX技術(shù)是一種經(jīng)過改良的SELEX技術(shù)。以完整細(xì)胞為靶標(biāo)的消減SELEX技術(shù)，是在篩選過程中以完整的細(xì)胞作為靶標(biāo)，并消減掉能與已知或未知的共有靶標(biāo)結(jié)合的配體，經(jīng)過消減后的次級隨機(jī)文庫再投入到特異靶標(biāo)的篩選中。它的意義在于可以實(shí)現(xiàn)從兩組高度同源的完整細(xì)胞中，篩選出針對其中一種細(xì)胞的特異性適配體。這項(xiàng)技術(shù)可應(yīng)用于發(fā)現(xiàn)新的腫瘤細(xì)胞識(shí)別結(jié)構(gòu)，還可進(jìn)一步作為“生物導(dǎo)彈”，獨(dú)立完成靶向治療或攜帶藥物，未來將會(huì)在腫瘤的治療中發(fā)揮巨大的功效。

2．2自動(dòng)化SELEX技術(shù)

傳統(tǒng)的SELEX技術(shù)過程需要完成一套重復(fù)繁瑣的操作，使得篩選相對耗時(shí)耗力。自動(dòng)化SELEX技術(shù)的建立可以簡化篩選過程，節(jié)約時(shí)間和物品的消耗，實(shí)現(xiàn)高通量和限定范圍，達(dá)到同時(shí)篩選多個(gè)靶分子的效果。自動(dòng)化SELEX技術(shù)離不開現(xiàn)代分離儀器的配合，后者的發(fā)展推動(dòng)了前者的進(jìn)步。2001年Cox等使用Biomek2000自動(dòng)化工作站成功篩選到了溶菌酶的特異性適配體，通過這種自動(dòng)化篩選平臺(tái)，不到2d就完成了12輪的篩選。

2．3導(dǎo)向SELEX技術(shù)

適配體的特異性是整個(gè)SELEX技術(shù)的核心所在，為了提高適配體的特異性和穩(wěn)定性，可將已知的能與靶標(biāo)非特異結(jié)合的分子摻入到文庫中或預(yù)先與靶標(biāo)進(jìn)行混合后再篩選，這樣可獲得只與靶標(biāo)特異結(jié)合的適配體。2002年Hamm等將此技術(shù)與抗個(gè)體基因型的方法聯(lián)合運(yùn)用，成功獲得了特定激酶抑制劑的特異性RNA適配體。Martell運(yùn)用特殊的導(dǎo)向SELEX技術(shù)，從隨機(jī)表達(dá)盒雜交文庫中篩選到了能與E2F蛋白具有高親和性的RNA適配體。

3SELEX技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

3．1SELEX技術(shù)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用

依據(jù)核酸適配體具有與靶物質(zhì)高特異性結(jié)合的能力，可以幫助我們尋找到疾病的發(fā)病機(jī)制。Roulet等提出把SELEX技術(shù)同基因表達(dá)串行分析手段聯(lián)合應(yīng)用，并通過自動(dòng)化的序列提取工藝，建立轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的定位模型。通過對轉(zhuǎn)錄因子適配體文庫中的某一序列進(jìn)行測序，可了解該蛋白結(jié)合位點(diǎn)的特異性，探尋一些以前在基因組中從未研究過的結(jié)合位點(diǎn)，掌握在不同的核苷酸位點(diǎn)上非獨(dú)立堿基出現(xiàn)的先后順序，為闡明其結(jié)合機(jī)制提供一些線索。Bian-chi等采取SELEX技術(shù)發(fā)現(xiàn)，TRF1二聚體在端粒上有兩個(gè)相同的識(shí)別半位點(diǎn)，它們的距離可以變化，且兩個(gè)半位點(diǎn)的順序方向沒有區(qū)別。這為探索端粒長度的調(diào)節(jié)機(jī)制提供了新依據(jù)。

3．2SELEX技術(shù)在疾病診斷中的應(yīng)用

腫瘤細(xì)胞及其標(biāo)志物的早期檢測對于腫瘤的診斷及預(yù)后極為重要，目前已經(jīng)篩選出多種腫瘤的特異性適配體，例如急性髓系白血病的適配體KH1C12、急性淋巴細(xì)胞白血病的適配體sgc8/sgc3/sgd3、惡性膠質(zhì)瘤的適配體GBI-10、Burrkitt淋巴瘤的適配體TD05、非小細(xì)胞肺癌的適配體S1/S11e/S15、小細(xì)胞肺癌的適配體HCA12/HCC03/HCH07/HCH01、乳腺癌的適配體KMF2-1a、結(jié)腸癌的適配體KDED2/KD-ED7/KDED9/KC2D3、小鼠肝癌的適配體TLS9a/TLS11a、卵巢癌的適配體DOV3/DOV4/DOV6。它們可以特異地識(shí)別腫瘤細(xì)胞，僅需少量腫瘤細(xì)胞即可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的鑒別和分型。將適配體與納米顆粒結(jié)合后通過比色檢測，觀察顏色的變化即可判斷有無靶標(biāo)細(xì)胞。這個(gè)實(shí)驗(yàn)非常敏感，樣本中的靶細(xì)胞數(shù)超過百個(gè)即可檢測出來，還不需要昂貴的檢測設(shè)備和待檢靶標(biāo)的標(biāo)記與修飾。因此，有可能成為常規(guī)篩查活體標(biāo)本中新生腫瘤細(xì)胞的一種新方案。與此同時(shí)腫瘤細(xì)胞的分子成像技術(shù)也已經(jīng)問世，它能夠從細(xì)胞水平對生物過程進(jìn)行可視化描述及測量，不僅能定位病灶，觀察某些影響腫瘤細(xì)胞行為的生物過程，還能觀察腫瘤細(xì)胞對藥物的反應(yīng)。Kim等研究將前列腺特異性膜抗原(PSMA)的特異性適配體與金納米材料結(jié)合后，帶有PSMA的前列腺癌細(xì)胞便能夠被特異性地標(biāo)記出來，將其作為造影劑應(yīng)用在前列腺腫瘤的影像學(xué)診斷中，比傳統(tǒng)的造影劑顯像時(shí)間更持久，毒副作用更小，應(yīng)用價(jià)值更顯著。SELEX技術(shù)還在血液的生化檢查方面，顯示出一定的應(yīng)用前景。用其檢測血液中的某些靶分子，將比傳統(tǒng)方法更特異和高效。腦尿鈉肽(BNP)常被臨床上用來評價(jià)急性心力衰竭或急性呼吸窘迫癥患者的病情和預(yù)后。Lin等采用SELEX技術(shù)的原理，篩選到了能與BNP特異結(jié)合的適配體。在微流體試驗(yàn)?zāi)Ｊ较?，被熒光?biāo)記的適配體可以快速測出血液中BNP的濃度，比放射免疫分析法或是免疫分析技術(shù)更精確、更經(jīng)濟(jì)。C反應(yīng)蛋白(CRP)是機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下生成的一種非特異性的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，CRP與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死等心血管疾病具相關(guān)性。Bini等開發(fā)出了一種帶有光化學(xué)性質(zhì)的CRP特異性適配體，當(dāng)血液中的CRP濃度超0．005mg/L時(shí)就能被檢測出來，敏感度非常高。這一成果為新型CRP診斷試劑的研制奠定了基礎(chǔ)。SELEX技術(shù)還被應(yīng)用在病原微生物的檢測，其能克服傳統(tǒng)檢測方法在特異性和敏感性上的缺陷，為新型檢測試劑盒的開發(fā)提供有力支持。例如結(jié)合分支桿菌的特異性適配體CSRI2．11檢測過程比傳統(tǒng)的培養(yǎng)鑒定法更省時(shí)更敏感;丙型肝炎病毒的適配體ZE2可結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)實(shí)現(xiàn)丙型肝炎的早期篩查，不受抗體檢測時(shí)窗口期的制約;瘧原蟲乳酸脫氫酶的適配體PL1在臨床實(shí)踐中，可以很好的區(qū)分患者是否感染了出間日瘧原蟲或惡性瘧原蟲。

3．3SELEX技術(shù)在疾病治療中的應(yīng)用

SELEX技術(shù)在疾病治療中的功效越來越來受到人們的重視。適配體在體內(nèi)與靶分子結(jié)合，理論上可以對靶分子的生理功能和代謝過程產(chǎn)生影響，靶分子也會(huì)因此發(fā)生信號(hào)傳導(dǎo)的改變甚至喪失原本的功能，直接或間接阻斷疾病發(fā)生進(jìn)程。以此開發(fā)的靶蛋白功能阻斷劑，日益顯示出其巨大的潛力。全球首個(gè)適配體藥物是2004年由美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)上市的哌加他尼鈉，可用來治療老年性黃斑變性。SELEX技術(shù)在凝血系統(tǒng)疾病的治療上具有一定的意義，已找到了可用作抗凝血和抗血栓藥物的適配體REG-1，其結(jié)合的位點(diǎn)是凝血酶的肝素結(jié)合位點(diǎn)以及纖維蛋白原結(jié)合位點(diǎn)。在治療免疫系統(tǒng)疾病方面，也已獲得了具有藥物開發(fā)潛力的特異性適配體，如可用來拮抗自身抗體已達(dá)到治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的適配體，還有能刺激T細(xì)胞釋放的4-1BB的適配體。對于腫瘤的治療，基于SELEX技術(shù)研制的適配體藥物更是走在前列，進(jìn)入到了臨床試驗(yàn)階段。如對實(shí)體瘤和復(fù)發(fā)性急性髓樣白血病有良好療效的AS1411，更出現(xiàn)了連接金納米棒的適配體，用作腫瘤靶向光熱治療。適配體藥物作為抗病毒藥，也展現(xiàn)出良好的前景，比如用來抑制狂犬病病毒的復(fù)制和干擾艾滋病病毒的體內(nèi)合成。除此以外，核酸適配體還可作為運(yùn)輸工具，特異性地把藥物運(yùn)送至靶標(biāo)細(xì)胞或組織達(dá)到定點(diǎn)清除的治療效果，研究比較成熟的有裝載著阿霉素，用來殺傷前列腺癌細(xì)胞的復(fù)合適配體藥物。

4展望

篇(2)

(1)醫(yī)學(xué)教學(xué)需要用到大量的大幅掛圖，在教學(xué)時(shí)攜帶大量的大幅掛圖不方便，現(xiàn)場繪制即浪費(fèi)時(shí)間又不能準(zhǔn)確真實(shí)表述出圖的內(nèi)容。

(2)“粉筆+黑板”的教學(xué)模式，由于教學(xué)手段單一、呆板，課堂氣氛死板、沉悶，不利于激發(fā)學(xué)生的想象力和創(chuàng)造力，學(xué)生的聽課積極性不高，教師的創(chuàng)造性思維也受到了抑制，容易使教師因循守舊、不思改進(jìn)，一本教案用幾年，以至知識(shí)老化，創(chuàng)造性思維枯竭。

(3)醫(yī)學(xué)教學(xué)素材眾多，難以長期保存。

(4)醫(yī)學(xué)知識(shí)繁瑣、復(fù)雜，課堂上老師苦于難把大量的知識(shí)傳授于大家，多數(shù)老師一味填鴨式的講授，不僅不會(huì)增加學(xué)生學(xué)習(xí)的效率，還會(huì)使學(xué)生產(chǎn)生厭煩情緒。學(xué)習(xí)資源和信息。

2多媒體技術(shù)在醫(yī)學(xué)教學(xué)中的重要性

(1)計(jì)算機(jī)多媒體技術(shù)把枯燥無味的知識(shí)形象、滿足不同學(xué)生的不同需要，使得學(xué)生在一定時(shí)間內(nèi)盡可能獲取更多的知識(shí)。

(2)多媒體技術(shù)可以節(jié)省板書時(shí)間，大大提高了課堂效率，還可以增加與老師溝通互動(dòng)的機(jī)會(huì)。

(3)多媒體技術(shù)的應(yīng)用改變了傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)教學(xué)過程單調(diào)枯燥的局面，完全可以在課下依靠網(wǎng)絡(luò)加強(qiáng)學(xué)習(xí)，而且多媒體技術(shù)實(shí)現(xiàn)了資源的共享，為學(xué)生提供了更多的

3多媒體教學(xué)在醫(yī)學(xué)教學(xué)中應(yīng)注意的事項(xiàng)

多媒體教學(xué)在醫(yī)學(xué)教學(xué)中產(chǎn)生了重大的變革，但是，應(yīng)用多媒體時(shí)，應(yīng)將多媒體作為教學(xué)的助力，不能成為教學(xué)的絆腳石。所以，使用多媒體技術(shù)時(shí)，應(yīng)注意以下幾個(gè)方面。

(1)避免遏制學(xué)生的想象力。這就造成教師在課堂上過多的進(jìn)行電腦操作，引導(dǎo)學(xué)生按照課件的指示進(jìn)行學(xué)習(xí)，在一定程度上抑制了學(xué)生的想象力。

(2)避免重回填鴨式教學(xué)。多媒體技術(shù)的廣泛應(yīng)用使教師的板書量大大減少，造成學(xué)生沒有足夠的時(shí)間進(jìn)行思考，導(dǎo)致教師無法全面的掌握學(xué)生學(xué)習(xí)的具體情況，對于教學(xué)中存在的問題不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和改正。

(3)避免過度依賴多媒體教學(xué)，使教師學(xué)生之間失去互動(dòng)性。學(xué)生也不會(huì)再認(rèn)真地去做筆記，整理自己的學(xué)習(xí)思路和知識(shí)體系，而是變得更愿意去依賴拷貝教師的教學(xué)資料。

4結(jié)論

篇(3)

AP－PCR基本原理與常規(guī)PCR類似，均為引物指導(dǎo)下的DNA擴(kuò)增，同樣包括變性、退火、延伸的基本步驟，其不同之處在于普通PCR使用的是序列特異性引物而AP－PCR過程中的引物是10個(gè)左右非特異性寡聚核苷酸鏈（隨機(jī)引物）。AP－PCR之所以能進(jìn)行是因?yàn)樵诜磻?yīng)過程中引物和模板并不需要完全的匹配，在較低的退火溫度下，只要引物的一部分特別是3′端有3～4個(gè)以上堿基與模板（DNA或RNA反轉(zhuǎn)錄的cDNA）互補(bǔ)復(fù)性且方向正確，距離在一定長度范圍內(nèi)，在TaqDNA聚合酶的作用下就可擴(kuò)增出一定長度的DN段，利用多個(gè)隨機(jī)引物可使檢測區(qū)域擴(kuò)大至整個(gè)基因組（Babu等，2014）。擴(kuò)增后的產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，核酸染料或放射性自顯影得到DNA指紋圖譜，從而分析比較其多態(tài)性或進(jìn)一步克隆分析（Babu等，2014）。

2、AP－PCR的技術(shù)方法和優(yōu)缺點(diǎn)

2．1模板DNA提取和質(zhì)量檢測

模板DNA提取的方法有很多，應(yīng)根據(jù)組織的不同和試驗(yàn)需要確定，但其基本的原理相同，都是通過酶或有機(jī)試劑裂解組織使核酸游離出來，然后通過有機(jī)溶劑或吸附柱純化后提取。核酸的濃度和質(zhì)量可通過UV分光光度計(jì)讀取D260nm與D280nm的比值和1％瓊脂糖凝膠電泳等檢測來確定（Mohini等，2011）。目前已有很多商品化的核酸提取試劑盒可供選擇，使用方便并可得到較高質(zhì)量的模板（DNA或cDNA）。

2．2隨機(jī)引物的選擇

隨機(jī)引物長度通常為10個(gè)堿基，GC的含量為60％～80％的寡聚核苷酸鏈，隨機(jī)引物不僅核苷酸的排列順序是隨機(jī)的，而且所有引物的序列無直接相關(guān)性（韋莉萍，2001）。理論上，如果1條隨機(jī)引物反應(yīng)可產(chǎn)生x個(gè)獨(dú)立的條帶，那么a條隨機(jī)引物同時(shí)參與反應(yīng)就可得到xa2個(gè)條帶，但多條引物同時(shí)參與反應(yīng)會(huì)相應(yīng)的增加結(jié)果的復(fù)雜性和不穩(wěn)定性（Nandani等，2014）。隨機(jī)引物雖然可用于所有物種，但并不是所有的隨機(jī)引物擴(kuò)增出來的結(jié)果都有意義，想要得到較為理想的結(jié)果仍需根據(jù)研究對象和研究目的進(jìn)行引物的篩選和反應(yīng)條件的優(yōu)化，一般來說選擇能產(chǎn)生中等復(fù)雜度的圖譜的引物（Nandani等，2014）。

2．3AP－PCR擴(kuò)增條件

AP－PCR也包括變性、退火、延伸的經(jīng)典PCR過程。變性過程在94℃進(jìn)行，一般來說預(yù)變性3～5min；退火溫度在35～38℃，也可根據(jù)引物Tm值來確定，一般退火溫度比引物Tm值低3～5℃；延伸溫度在72℃，在此溫度下Taq酶的合成效率約為2000bp／min（Kumari等，2013）。AP－PCR的試驗(yàn)條件、模板的質(zhì)量和濃度及反應(yīng)體系中Mg2＋的濃度等都可能對擴(kuò)增的結(jié)果產(chǎn)生影響，想要得到較為理想的試驗(yàn)結(jié)果，反應(yīng)體系的優(yōu)化和試驗(yàn)操作的標(biāo)準(zhǔn)化是非常重要的（Mohini等，2011；Kumari等，2013；Babu等，2014）。

2．4AP－PCR的優(yōu)點(diǎn)

AP－PCR延續(xù)了PCR的效率高、靈敏度高、樣品用量少等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)又兼有自身的優(yōu)點(diǎn)：①不同種類的生物樣品即可使用通用的隨機(jī)引物進(jìn)行基因分析（Welsh等，1991）；②可在對研究對象不了解的情況下進(jìn)行基因多態(tài)性分析，從而對研究對象進(jìn)行遺傳分析和分類研究（Williams等，1990；Welsh等，1991）；③對于研究對象DNA樣品量有限的情況也適用（Nandani等，2014）；④隨機(jī)引物易獲得，試驗(yàn)成本低，技術(shù)容易掌握，除此之外，可對AP－PCR產(chǎn)生的基因條帶進(jìn)行純化和克隆，以便進(jìn)一步分析（Ge等，2014）。

2．5AP－PCR的局限性

AP－PCR雖然具有很多獨(dú)特的優(yōu)勢，但目前仍處于應(yīng)用的探索階段，其本身仍有局限性：①AP－PCR技術(shù)通常是對顯性基因標(biāo)記進(jìn)行分析，這就意味著不能將純合子與雜合子區(qū)別開（Babu等，2014）；②由于無明確的目的序列，如果發(fā)生擴(kuò)增條帶的缺失就無法得知是什么原因?qū)е碌?，不利于對擴(kuò)增結(jié)果的分析（Kumari等，2013）；③AP－PCR的結(jié)果分析需要專業(yè)的帶譜分析知識(shí)，否則很難從結(jié)果中得到有意義的信息；④AP－PCR結(jié)果的重復(fù)性問題一直是限制其廣泛應(yīng)用的主要原因，由于其結(jié)果受DNA模板的質(zhì)量、反應(yīng)體系成分和反應(yīng)條件的變化等因素的影響，其擴(kuò)增產(chǎn)物的穩(wěn)定性難以控制（Mohini等，2011）；⑤AP－PCR結(jié)果通過凝膠電泳來觀察，但遷移率相同的譜帶的核苷酸同源型不明等情形易造成干擾，有時(shí)電泳遷移率相同的片段并非同源，這就給結(jié)果分析帶來很多不確定性（Nandani等，2014）。

3、AP－PCR技術(shù)研究進(jìn)展

3．1AP－PCR技術(shù)自身的優(yōu)化

近年來，不斷有研究者對AP－PCR技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)和優(yōu)化，使其更具可操作性、實(shí)用性和更廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域。劉剛等（2004）對AP－PCR進(jìn)行了優(yōu)化，建立了多重隨機(jī)引物PCR（M－RAPD）技術(shù)，M－RAPD通過使用3條組合的隨機(jī)引物在較高的退火溫度下對肺炎鏈球菌、糞腸球菌和大腸埃希菌耐藥菌株等的染色體DNA進(jìn)行擴(kuò)增獲得了穩(wěn)定的種株特異性的DNA指紋圖，其所提供的基因信息要遠(yuǎn)多于傳統(tǒng)的RAPD技術(shù)。Xiong等（2012）對AP－PCR進(jìn)行了反應(yīng)程序優(yōu)化和隨機(jī)引物中G／（G＋C）不同比例研究，結(jié)果表明，反應(yīng)程序中從退火步驟到延伸步驟的時(shí)間延長，溫度變化由3℃／s下降到0．3℃／s時(shí)，PCR產(chǎn)物條帶明顯增加，這可能是由于延長溫度變化的時(shí)間可提高引物與模板結(jié)合的穩(wěn)定性（Fu等，2000），在比較了隨機(jī)引物中G／（G＋C）不同比例的PCR產(chǎn)物后發(fā)現(xiàn)，當(dāng)G／（G＋C）比例在0．7時(shí)PCR產(chǎn)物的條帶最多，也更適用于進(jìn)行AP－PCR反應(yīng)，因此反應(yīng)程序的溫度變化和隨機(jī)引物中G／（G＋C）的比例可能也是影響AP－PCR結(jié)果的重要因素。Zou等（2003）報(bào)道了利用兩步AP－PCR方法在微量DNA樣品中擴(kuò)增未知序列DNA并進(jìn)行克隆。第1步PCR利用29個(gè)核苷酸序列的引物進(jìn)行擴(kuò)增，Ran5－29（5′－GTTCTACACGAGTCACTGCA－GNNNNNNNTGGC－3′），這一隨機(jī)引物包括21個(gè)已知核苷酸序列部分，7個(gè)隨機(jī)核苷酸序列和1個(gè)3′端TGGC的卡子結(jié)構(gòu)，在隨機(jī)序列前6個(gè)核苷酸序列構(gòu)成了1個(gè)PstⅠ位點(diǎn)，其中3′端卡子結(jié)構(gòu)在退火時(shí)可與含有GCCA位點(diǎn)結(jié)合，保證了隨機(jī)序列可與GCCA上游的序列匹配，3′端TGGC的卡子結(jié)構(gòu)可使引物與模板的匹配數(shù)增加7～11個(gè)核苷酸，PstⅠ位點(diǎn)決定PCR產(chǎn)物的長度，并保留1個(gè)黏性末端，保證了克隆的順利進(jìn)行。第2步PCR使用可與Ran5－29相匹配的19個(gè)核苷酸的Fix5－29（5′－GTTCTACACGAGTCACTGC－3′）作為引物，獲得的產(chǎn)物進(jìn)行純化、克隆分析。結(jié)果表明這種策略可檢測臨床樣本DNA的最小量在1pg，克隆靈敏度達(dá)到100fg目的DNA模板。這種方法較普通AP－PCR靈敏度更高，適用于樣本量極少的臨床樣品檢測。Clem等（2007）在對比了AP－PCR方法的不同擴(kuò)增策略，在此基礎(chǔ)上建立一種快速有效的檢測不明病原的多重隨機(jī)RT－PCR方法。在對血液樣本進(jìn)行過濾后加入了DNase和RNase消化，利用宿主基因?qū)Nase和RNase敏感而衣殼保護(hù)的病毒對其不敏感的特點(diǎn)，去除宿主自身基因的污染。其利用單一十聚核苷酸為引物，引物序列為（V8A2）5′－VVVVVVVVAA－3′，V＝A、G或C，3′2個(gè)A提供了一個(gè)“l(fā)ock”結(jié)構(gòu)，引物中不含有胸腺嘧啶脫氧核苷酸（T）可避免發(fā)生引物二聚體，但這一結(jié)構(gòu)不可避免的會(huì)影響引物與模板的結(jié)合。試驗(yàn)結(jié)果一旦監(jiān)測到病毒的擴(kuò)增產(chǎn)物即可通過鳥槍法克隆測序鑒定。這一方法對病毒的出現(xiàn)或重組進(jìn)行快速監(jiān)測和鑒定有很強(qiáng)的實(shí)用性，其檢測靈敏度達(dá)到1000克隆／mL，應(yīng)用這一技術(shù)成功從血液樣品中檢測并獲得了3種獨(dú)立病毒的部分序列。

3．2以AP－PCR為基礎(chǔ)衍生的分子生物學(xué)技術(shù)

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，單一的AP－PCR技術(shù)已不能滿足研究的需要，因此為了克服AP－PCR的一些缺點(diǎn)在其基礎(chǔ)上衍生出包括非序列依賴單引物PCR（SISPA）、簡并核苷酸引物PCR（DOP－PCR）、DNA擴(kuò)增指紋印記（DAF）、微衛(wèi)星引物PCR（MP－PCR）等分子生物學(xué)技術(shù)。SISPA方法最早是由Reyes等（1991）建立起來的，其以AP－PCR為基礎(chǔ)，非對稱的單一引物與DNA模板的鈍末端直接連接，隨后經(jīng)過若干循環(huán)的變性、退火和延伸后，模板的數(shù)量得到擴(kuò)增，后經(jīng)克隆、測序、分析得到基因序列。Breitbart等（2005）在SISPA的基礎(chǔ)上建立了DNase－SISPA聯(lián)用的方法，增加了樣品過濾和DNA酶消化等步驟，成功的從人的血液臨床樣品中發(fā)現(xiàn)了新的病毒基因。Djikeng等（2008）在已有研究基礎(chǔ)上進(jìn)行了新的改進(jìn)，在樣品的處理中加入RNase酶以清除外源RNA的污染如核糖體RNAs。針對有polyA尾的病毒，在反轉(zhuǎn)錄過程中加入六聚核苷酸隨機(jī)引物5′端加入一段病毒特異性引物序列，形成結(jié)合引物（FR26RV－N：5′－GCCGGAGCTCTGCAGATATC－NNNNNN－3′），同時(shí)加入連接polyT的引物（FR40RV－T：5′－GCCGGAGCTCTGCAGATATC－TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT－3′）以增加對病毒基因3′端的覆蓋率。這種在六聚體隨機(jī)引物連接一保守序列即病毒特異性引物，可增加對病毒基因5′的捕獲，從而使SISPA的成功率大大提高。DOP－PCR技術(shù)是在AP－PCR基礎(chǔ)上建立起來，其引物（DOP－ORI－Xho）由22個(gè)核苷酸組成，3′和5′端的特異核苷酸序列和中間的6個(gè)核苷酸構(gòu)成的隨機(jī)引物組成（Telenius等，1992）。由于隨機(jī)引物的簡并性，每個(gè)反應(yīng)包含著數(shù)以千對的引物。DOP－PCR的反應(yīng)程序包含2個(gè)不同的部分，前5個(gè)循環(huán)引物的3′端至少有12個(gè)連續(xù)的核苷酸與模板DNA相結(jié)合，對引物和模板的匹配度要求不高，在隨后的30～40個(gè)循環(huán)里，擴(kuò)增錯(cuò)配的幾率會(huì)逐漸降低。初始反應(yīng)產(chǎn)物將成為模板，用相同的引物進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物通過克隆測序即可獲得基因序列（韓燾等，2013）。Csaba等（2002）打破了DOP－PCR只用同一種引物的傳統(tǒng)，嘗試了5條新的可用于反應(yīng)的引物，使反應(yīng)時(shí)間由原來的7～8h縮短為2h，縮短了變性過程的時(shí)間，在取得理想結(jié)果的同時(shí)，減少了擴(kuò)增酶的用量，提高了DOP－PCR的效率和實(shí)用性。DAF是一種改進(jìn)的AP－PCR分析技術(shù)，與AP－PCR技術(shù)不同的是，DAF使用的引物濃度更高，長度更短（約5～8個(gè)堿基），在PCR反應(yīng)上只包含2個(gè)溫度的循環(huán)，省去了延伸的步驟，使用聚丙烯酰胺凝膠電泳，通過銀染方法觀察結(jié)果。DAF通常會(huì)產(chǎn)生非常復(fù)雜的帶型，因此它所提供的譜帶信息也比AP－PCR大得多（Caetano－Anolles等，1993）。Al－h(huán)ag等（2007）應(yīng)用DAF鑒定8株細(xì)胞系，研究結(jié)果表明，DAF可產(chǎn)生穩(wěn)定的可供區(qū)分的PCR譜帶。Ehsan等（2011）應(yīng)用DAF技術(shù)對分離到的25株牛隱孢子蟲進(jìn)行亞型的鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)分離的25個(gè)蟲株分屬于為3個(gè)不同的亞型。MP－PCR是以AP－PCR為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)。Ma等（1996）發(fā)現(xiàn)真核生物基因組中存在短串聯(lián)重復(fù)序列，又稱微衛(wèi)星DNA或簡單重復(fù)序列（simplesequencerepeats，SSR）。真核生物基因組中SSR的分布是隨機(jī)的，大約每隔10～50kb就有1個(gè)SSR。SSR位點(diǎn)最常見是雙核苷酸重復(fù)，即（CA）n和（TG）n，每個(gè)微衛(wèi)星DNA的核心序列結(jié)構(gòu)相同，重復(fù)單位數(shù)目10～60個(gè)。MP－PCR的引物是與SSR位點(diǎn)互補(bǔ)的二聚或三聚核苷酸重復(fù)序列，如其引物序列可是（TA）10或（CGA）6，擴(kuò)增的是SSR之間不同長度的DNA序列，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳，根據(jù)分離片段的大小決定基因型并計(jì)算等位基因頻率（Dawson等，2013）。MP－PCR克服了AP－PCR引物的不確定性，增加了PCR產(chǎn)物譜帶的穩(wěn)定性和針對性，該技術(shù)也已廣泛應(yīng)用于物種分子標(biāo)記、基因圖譜繪制和基因差異性分析等方面（Tian等，2014；Ding等，2014；Wei等，2014）。

3．3AP－PCR與其他分子生物學(xué)技術(shù)的聯(lián)用

擴(kuò)增片段長度多態(tài)性（AFLP）技術(shù)是將基因組DNA先用限制性內(nèi)切酶切割，然后將雙鏈接頭連接到DN段的末端，接頭序列和相鄰的限制性位點(diǎn)序列，作為引物結(jié)合位點(diǎn)（Rikalainen，2013）。針對AP－PCR結(jié)果譜帶核苷酸同源性無法確定的缺點(diǎn)，Tan等（2011）將AP－PCR與AFLP進(jìn)行聯(lián)用，利用2種方法各自的優(yōu)勢，在對可能含有未知病原的臨床樣品進(jìn)行檢測，以實(shí)驗(yàn)室確診的登革1型病毒為陽性對照，首先用AP－PCR對有限的樣品基因進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增，然后使用AFLP技術(shù)對進(jìn)行擴(kuò)增從而得到樣品穩(wěn)定的DNA多態(tài)性標(biāo)記。此方法克服了AP－PCR的同源性不明問題，同時(shí)比單獨(dú)使用的AFLP方法進(jìn)行檢測的靈敏度提高100倍，在臨床樣品的檢測中有很大的實(shí)用價(jià)值。高通量的測序技術(shù)也被稱為下一代的測序技術(shù)，其與AP－PCR技術(shù)的配合使用，讓AP－PCR有了更廣闊的應(yīng)用前景。Hang等（2012）首先使用錨定隨機(jī)引物P17N8（5′－GTTTCCCAGTAGGTCT－CNNNNNNNN－3′）進(jìn)行RNA反轉(zhuǎn)錄，在通過錨定隨機(jī)引物P17N8和P21（5′－CGCCGTTTCCCAG－TAGGTCTC－3′）同時(shí)進(jìn)行AP－PCR擴(kuò)增，再通過高通量的測序技術(shù)對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序，對得到的基因序列進(jìn)行拼接處理，從而得到了奧羅普切病毒和卡拉帕魯病毒L片段完整基因序列。vanderHeij－den等（2012）利用序列非依賴性病毒基因片段擴(kuò)增方法與Roche－454測序技術(shù)聯(lián)用，成功的從患急性肝炎病犬的肝臟組織檢測出犬Ⅰ型腺病毒基因，研究結(jié)果表明AP－PCR技術(shù)和下一代的測序技術(shù)聯(lián)合使用的方法在獲得病毒完整基因序列和檢測病原等方面的實(shí)用性。

4、AP－PCR技術(shù)在動(dòng)物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

4．1在傳染病流行病學(xué)和病原遺傳學(xué)分類中的應(yīng)用AP－PCR由于其獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢，在獸醫(yī)傳染病學(xué)和病原遺傳學(xué)分類中已得到廣泛應(yīng)用。Leh－marn等（1992）用此技術(shù)對念珠菌屬的分離菌進(jìn)行分析，試驗(yàn)結(jié)果表明，同一菌種的不同菌型間呈現(xiàn)出DNA長度的多態(tài)性；此帶型圖在同一菌種的不同菌型間，其相似程度遠(yuǎn)大于不同種的菌株，這也說明每種菌的隨機(jī)引物PCR帶型極具特征性。Louie等（1996）用2種引物檢查15株李斯特單核菌相關(guān)流行分離株和36株不相關(guān)流行分離株。經(jīng)擴(kuò)增后的帶型分析，將其分為9個(gè)型，每個(gè)型中又分有不同的亞型。Zadoks等（2000）在牛乳樣品中分離到23株金黃色葡萄球菌，經(jīng)AP－PCR鑒定1～8株屬于Ⅰ型菌，9～20株屬于Ⅱ型菌，其余3株分別屬于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型菌。Butler等（2001）應(yīng)用該技術(shù)對3次牛霉形體暴發(fā)流行菌株進(jìn)行了檢測，結(jié)果表明，發(fā)生在其中2個(gè)養(yǎng)牛場的流行病原菌具有一致的指紋圖，引而具有相同的感染來源，而在另一牛場分離的菌株間則顯示了指紋圖譜的顯著異型性，說明它們具有多個(gè)感染來源。王雪敏等（2011）利用多組隨機(jī)引物對副雞禽桿菌10個(gè)國際標(biāo)準(zhǔn)株、血清C型疫苗株和4個(gè)國內(nèi)分離株進(jìn)行AP－PCR擴(kuò)增，結(jié)果顯示，所有菌株可分為11個(gè)譜型，聚為4類。劃分的11個(gè)譜型可和現(xiàn)有分型方法中的不同亞型一一對應(yīng)，提示這種方法可區(qū)分不同血清亞型。AP－PCR作為寄生蟲遺傳學(xué)分類鑒定的方法已得到廣泛應(yīng)用，克服了傳統(tǒng)分類方法難以解決的問題。Macph－eson等（1993）應(yīng)用AP－PCR技術(shù)區(qū)分來自不同宿主的7種艾美爾球蟲，結(jié)果表明選擇合適的引物可對7種球蟲進(jìn)行鑒別。張偉信等（2003）應(yīng)用該技術(shù)對雞柔嫩艾美耳球蟲不同地理株的多態(tài)性研究，結(jié)果表明不同地理株間及同一地理株親代與子代間均存在DNA多態(tài)性差異，其中不同地理株間種內(nèi)變異程度較大，同一地理株子代與親代間也發(fā)生遺傳變異，但變異程度較小。

4．2在病原差異基因分析中的應(yīng)用

AP－PCR技術(shù)進(jìn)行RNA指紋圖譜分析不僅能鑒定基因的表達(dá)差異，而且能顯示低水平表達(dá)的基因差異。Nicho－las（2000）應(yīng)用此方法鑒定了絲裂霉素C誘導(dǎo)下鼠傷寒沙門氏菌SOS調(diào)控基因表達(dá)的差異，結(jié)果表明，絲裂霉素C誘導(dǎo)后21條基因譜帶出現(xiàn)表達(dá)水平的上調(diào)，其中20個(gè)基因片段對應(yīng)的是可辨識(shí)的基因序列，15個(gè)基因序列與數(shù)據(jù)庫中基因序列無同源性，被確定為新的表達(dá)序列，6個(gè)基因片段與SOS基因編碼的調(diào)控蛋白有關(guān)。Diana等（2005）應(yīng)用AP－PCR技術(shù)對芐硝唑作用下克氏錐蟲基因表達(dá)差異多態(tài)性的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對芐硝唑敏感和對芐硝唑抵抗種群之間系統(tǒng)指紋圖譜存在一定的差異，其中可能存在克氏錐蟲對芐硝唑擁有抗性的表達(dá)機(jī)制，雖然抗性種群在芐硝唑作用下系統(tǒng)指紋圖譜沒有明顯的變化，但敏感種群間的系統(tǒng)指紋圖譜卻有著明顯的變化。AP－PCR技術(shù)為鑒定基因差異提供了一種快速有效的方法。

4．3在未知病原檢測中的應(yīng)用

病原微生物引起的動(dòng)物疫病呈現(xiàn)出復(fù)雜性和非典型性等特征，普通的臨床診斷方法很難確定病原的種類，這種情況下使用傳統(tǒng)PCR方法檢測臨床樣品的效率不高，而且存在漏檢可能。AP－PCR技術(shù)提供了一個(gè)更為全面、快速和靈活的檢測方法，對病原微生物進(jìn)行全基因組的檢測（姚四新等，2010）。Djikeng等（2008）使用DNase－SISPA技術(shù)在牛的血清中分離到牛鼻病毒基因。Clem等（2007）利用改進(jìn)的AP－PCR方法，從血液樣品中檢測并獲得了3種獨(dú)立病毒的部分序列，即腺病毒17、卡薩奇病毒A7和呼吸道合包體病毒B。周斌等（2004）在研究鴨病毒性肝炎病毒時(shí)，發(fā)現(xiàn)其種毒可能受到污染，隨后挑選4條隨機(jī)引物對其進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出3條基因片段?？寺y序的結(jié)果表明，與禽腺病毒（雞胚致死孤兒病毒）基因組部分序列同源性分別高達(dá)99．5％、99．6％和99．5％，從而確定了鴨病毒性肝炎病毒雞胚尿囊液種毒受到禽腺病毒的污染。黃欣梅等（2011）采用DNase－SISPA對導(dǎo)致鴨、鵝產(chǎn)蛋下降的病原基因進(jìn)行擴(kuò)增，并在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)了1對特異性引物成功的擴(kuò)增出新型鵝黃病毒JS804毒株基因。

5、小結(jié)

篇(4)

1臨床資料

納入標(biāo)準(zhǔn)：患肝膽胰疾病，有手術(shù)指征，無明顯手術(shù)禁忌證，并且同意手術(shù)，意識(shí)清楚的患者。收集我院肝膽外科2011年12月—2012年12月符合標(biāo)準(zhǔn)的手術(shù)患者200例作為對照組，年齡（53.10±11.20）歲，男112例，女88例；肝膽管結(jié)石病55例，原發(fā)性肝癌48例，胰腺腫瘤10例，門靜脈高壓癥12例，肝門部膽管癌30例，膽囊癌45例。收集2013年1月—2014年1月符合納入標(biāo)準(zhǔn)的接受個(gè)體化3D診療模型指導(dǎo)術(shù)前討論的手術(shù)患者200例作為觀察組，年齡（54.4±12.7）歲，男118例，女82例；肝膽管結(jié)石病57例，原發(fā)性肝癌53例，胰腺腫瘤12例，門靜脈高壓癥8例，肝門部膽管癌40例，膽囊癌30例。兩組患者年齡、性別、疾病診斷的構(gòu)成比等方面相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05），具有可比性。

2方法

2.1對照組

實(shí)施常規(guī)術(shù)前討論模式。術(shù)前討論開始前，主管醫(yī)生準(zhǔn)備患者資料、各項(xiàng)檢查結(jié)果及影像學(xué)資料。討論時(shí)只由醫(yī)療團(tuán)隊(duì)組成，各級醫(yī)生按病歷記錄進(jìn)行討論。護(hù)士遵醫(yī)囑執(zhí)行各項(xiàng)操作。患者及家屬被告知討論結(jié)果。

2.2觀察組

實(shí)施以數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維可視化系統(tǒng)為依托、醫(yī)護(hù)患三方參與的術(shù)前討論模式。（1）重建出患者病灶的數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維重建圖像，具體步驟：患者術(shù)前行64排螺旋增強(qiáng)CT薄層掃描；將CTDICOM圖像數(shù)據(jù)上傳HP服務(wù)器，將服務(wù)器的DICOM導(dǎo)入到Mxview工作站；在Mxview工作站中，進(jìn)行數(shù)據(jù)的刻盤存貯；將數(shù)據(jù)導(dǎo)入腹部醫(yī)學(xué)圖像三維可視化系統(tǒng)（MI-3DVS）軟件中，進(jìn)行三維重建，得到患者病灶的數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維重建圖像。（2）責(zé)任護(hù)士、護(hù)理組長及護(hù)士長在術(shù)前討論之前，掌握患者護(hù)理資料，并查閱相關(guān)資料。（3）全科醫(yī)生、護(hù)士長、護(hù)理組長、責(zé)任護(hù)士、手術(shù)配合護(hù)士、患者及家屬圍座一起，共同參與術(shù)前討論。（4）主管醫(yī)生匯報(bào)患者病情及相關(guān)資料，使用旭東公司三維閱讀軟件（viewer）播放患者病灶的數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維重建圖像。（5）責(zé)任護(hù)士匯報(bào)患者的護(hù)理資料。（6）各級醫(yī)生討論制定手術(shù)方案，并進(jìn)行仿真手術(shù)演示。（7）護(hù)士長、護(hù)理組長和責(zé)任護(hù)士根據(jù)術(shù)前討論情況，以及患者的病情、手術(shù)情況、個(gè)性特征和需求制定護(hù)理措施。（8）手術(shù)配合護(hù)士根據(jù)討論結(jié)果預(yù)先做好器械、耗材及患者等準(zhǔn)備。

2.3評價(jià)指標(biāo)

評價(jià)兩組患者在并發(fā)癥發(fā)生率、住院日、護(hù)理服務(wù)滿意率。并發(fā)癥包括膽瘺、腸瘺、胰瘺、吻合口出血、胸腔積液、傷口出血、傷口及腹腔內(nèi)感染、肺部感染、泌尿系感染、門靜脈及下肢深靜脈血栓、壓瘡等，統(tǒng)計(jì)并發(fā)癥發(fā)生率。以上數(shù)據(jù)均由醫(yī)院質(zhì)量管理科在患者治愈出院后統(tǒng)計(jì)所得。

2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS13.0進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3結(jié)果

對照組發(fā)生1起醫(yī)療糾紛，觀察組未發(fā)生醫(yī)療糾紛。兩組患者并發(fā)癥發(fā)生率、平均住院日、護(hù)理服務(wù)態(tài)度滿意率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

4討論

4.1實(shí)施以數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維可視化系統(tǒng)為依托、醫(yī)護(hù)患三方參與的術(shù)前討論模式,降低了患者術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生率，縮短了平均住院日觀察組實(shí)施以數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維可視化系統(tǒng)為依托、醫(yī)護(hù)患三方參與的術(shù)前討論模式，一方面，醫(yī)學(xué)圖像三維重建是通過64排螺旋CT和MI一3DVS軟件得到的仿真模型，重建的三維圖像有較強(qiáng)的真實(shí)感，能立體地顯示肝膽、胰、脾病灶及其內(nèi)部管道結(jié)構(gòu)的位置、形態(tài)及其與周圍大血管等結(jié)構(gòu)的解剖關(guān)系，可按照使用者的意圖，通過放大、縮小、旋轉(zhuǎn)從任意角度和任意距離來觀察，并可設(shè)置肝臟、膽管或血管的透明度，充分顯示出它們的解剖學(xué)關(guān)系，幫助醫(yī)生在手術(shù)前合理制定個(gè)體化的手術(shù)方案，選擇最佳的手術(shù)方式[2]。護(hù)士通過直接、形象地觀看，等于參與了整個(gè)手術(shù)過程，對于手術(shù)的方式、部位、引流管放置的具置等有了預(yù)先、清楚地了解，為提前做好術(shù)后準(zhǔn)備、護(hù)理計(jì)劃和應(yīng)對措施提供了依據(jù)。另一方面，醫(yī)、護(hù)、患三方共同參與的術(shù)前討論，不僅使責(zé)任護(hù)士對疾病的病因、治療、診斷、護(hù)理等方面的知識(shí)有了更深、更全面的了解，使醫(yī)生能及時(shí)獲取患者的病情變化、心理狀況和護(hù)理計(jì)劃；配合手術(shù)護(hù)士能為第2天的手術(shù)做好周密的儀器和材料準(zhǔn)備；而且由于患者及家屬的參與，使護(hù)士能針對不同文化背景、不同職業(yè)、不同需求的患者制定出更合適、具有個(gè)性化、全面的術(shù)后診療護(hù)理路徑。醫(yī)護(hù)患三方參與術(shù)前討論模式的實(shí)施，增加了手術(shù)成功率、減小了手術(shù)損傷、降低了手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)和術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率，從而縮短了平均住院日。

4.2實(shí)施以數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維可視化系統(tǒng)為依托、醫(yī)護(hù)患三方參與的術(shù)前討論模式,提高了患者滿意度，減少了醫(yī)療護(hù)理糾紛因文化背景、職業(yè)和來源的不同，不同患者對專業(yè)知識(shí)的理解能力存在很大的差異；也由于手術(shù)的不可知性，使患者及家屬在手術(shù)前產(chǎn)生很大的心理、精神壓力，無法充分理解手術(shù)的必要性和可能性。一方面對手術(shù)寄予很大的希望，一方面又心存懷疑和恐慌，一旦手術(shù)出現(xiàn)意外，醫(yī)療糾紛很快產(chǎn)生。運(yùn)用腹部醫(yī)學(xué)圖像三維可視化系統(tǒng)得出的仿真模型和仿真手術(shù)的演示，能更加直觀和形象地顯示病灶的部位、大小、與周圍血管的關(guān)系等等，再通過醫(yī)護(hù)雙方進(jìn)行通俗地講解，使患者清楚自己的病情和手術(shù)情況。在可知的情況下，把人體內(nèi)臟及手術(shù)所帶來的神秘面紗揭開，增強(qiáng)了患者康復(fù)的信心和科學(xué)的期望值。而醫(yī)、護(hù)、患三方共同參與的術(shù)前討論，不僅滿足了每例患者的個(gè)性特征、不同需求和情感心理需求，減輕了焦慮，使患者從以往的被動(dòng)接受治療轉(zhuǎn)為主動(dòng)參與治療，更了解了如何配合治療，從而增強(qiáng)了患者戰(zhàn)勝疾病的信心和毅力，促進(jìn)了疾病的康復(fù)；又密切了三方關(guān)系，使患者對醫(yī)護(hù)人員的理解和信任度增加，提高了服務(wù)態(tài)度滿意率，減少了醫(yī)療護(hù)理糾紛的發(fā)生。

4.3實(shí)施以數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維可視化系統(tǒng)為依托、醫(yī)護(hù)患三方參與的術(shù)前討論模式,全面提高了護(hù)士的知識(shí)、能力和責(zé)任心責(zé)任護(hù)士參與術(shù)前討論，并與醫(yī)生及患者共同制定術(shù)后的診療護(hù)理路徑，不但需要全面了解患者的病情、詳細(xì)資料，而且必須掌握相關(guān)疾病的知識(shí)、營養(yǎng)學(xué)及心理學(xué)等方面的知識(shí)。因此促使了責(zé)任護(hù)士在平時(shí)通過學(xué)習(xí)和實(shí)踐,不斷鞏固自身的專業(yè)知識(shí)和獲取新的知識(shí)，并在實(shí)施術(shù)前討論之前查閱、學(xué)量的相關(guān)資料以做好討論的準(zhǔn)備。在討論時(shí)，主管醫(yī)生介紹手術(shù)患者的病史、體征、各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查、鑒別診斷，播放患者的數(shù)字醫(yī)學(xué)技術(shù)三維重建圖像，各級醫(yī)生進(jìn)行分析、討論、確定手術(shù)方案、術(shù)式，并進(jìn)行仿真手術(shù)的演示，最后制定術(shù)后的診療護(hù)理路徑。在這一過程中，責(zé)任護(hù)士對相關(guān)疾病的知識(shí)有了更加直觀、形象的、更深層次的體會(huì)和了解，并增強(qiáng)了護(hù)理患者的信心。

篇(5)

1.1基因擴(kuò)增技術(shù)1983年美國Cetus公司的Mullis發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(polymerasechainreaction,PCR)，該技術(shù)利用DNA高溫變性和低溫復(fù)性的原理，通過變性、復(fù)性和延伸3個(gè)溫度變化，成功實(shí)現(xiàn)核酸片段的體外擴(kuò)增。PCR技術(shù)以其特異性高、靈敏度高、簡便、快速，對標(biāo)本的純度要求低等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用到醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、食品檢驗(yàn)等領(lǐng)域。PCR技術(shù)分為兩種：常規(guī)PCR技術(shù)和實(shí)時(shí)PCR技術(shù)。常規(guī)PCR技術(shù)，指僅對PCR擴(kuò)增反應(yīng)的終點(diǎn)產(chǎn)物進(jìn)行定性或半定量分析，無法對起始模板準(zhǔn)確定量，也無法對擴(kuò)增反應(yīng)實(shí)時(shí)檢測的一項(xiàng)核酸擴(kuò)增技術(shù)，但該技術(shù)所需技術(shù)平臺(tái)和儀器設(shè)備較低，花費(fèi)成本相對也低，目前臨床上主要運(yùn)用該平臺(tái)對定性項(xiàng)目進(jìn)行檢測，例如：缺失基因、突變基因、融合基因等的檢測。實(shí)時(shí)PCR技術(shù)，又稱實(shí)時(shí)定量熒光PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的技術(shù)。實(shí)時(shí)PCR技術(shù)，具有特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好等特點(diǎn)，在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)上主要應(yīng)用于核酸定量、mRNA表達(dá)水平分析等，可以分析和指導(dǎo)臨床用藥、監(jiān)測藥物療效、判斷病情進(jìn)展。

1.2基因測序技術(shù)1977年Maxam提出了化學(xué)修飾降解法模型，為核酸測序時(shí)代的到來拉開序幕。同年，Sanger等發(fā)明了DNA雙脫氧鏈末端終止法，可以檢測物種或細(xì)胞的核酸序列，再與基因庫進(jìn)行比對，從而知道被檢測物種或細(xì)胞的特性。Sanger法作為最經(jīng)典的測序方法，讀取序列長，能夠較好地處理重復(fù)序列和多聚體，仍為目前常用的測序方法，廣泛應(yīng)用于基因組DNA、cDNA等多重復(fù)序列的檢測。該技術(shù)不足之處：靈敏度較低，通量較低。1998年Ronaghi發(fā)明了焦磷酸測序法，其基本原理是利用引物延伸時(shí)所釋放的焦磷酸基團(tuán)激發(fā)熒光，通過峰值高低判斷與其匹配的堿基數(shù)量。比起Sanger法，提高了靈敏度，在SNP位點(diǎn)檢測、等位基因突變測定等廣泛運(yùn)用。近幾年，發(fā)明了高通量測序技術(shù)，是對傳統(tǒng)技術(shù)的一次革命性的創(chuàng)新。該技術(shù)通過DN段化構(gòu)建DNA文庫、文庫與載體交聯(lián)進(jìn)行擴(kuò)增、在載體面上進(jìn)行邊合成邊測序反應(yīng)，完成對海量數(shù)據(jù)的高通量測序。該技術(shù)測序速度快、準(zhǔn)確度高，可以進(jìn)行大規(guī)模的測序檢測，主要應(yīng)用于全基因組序列、內(nèi)含子序列、外顯子序列等的分析和研究。

2分子診斷學(xué)技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

分子診斷就是應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)，在遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平，通過檢測特定基因存在、轉(zhuǎn)錄及表達(dá)異常，對人體狀態(tài)和疾病作出診斷的方法。分子診斷學(xué)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，使越來越多的疾病的發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制得到闡明，為臨床醫(yī)生對疾病的診斷、治療和預(yù)后，提供最為直接、最為準(zhǔn)確的依據(jù)。目前分子診斷學(xué)技術(shù)在感染性疾病和遺傳性疾病中的應(yīng)用最為廣泛。

2.1分子診斷學(xué)技術(shù)在感染性疾病的應(yīng)用感染性疾病是指外源病原體入侵機(jī)體后，生物體無法排除該病原體而產(chǎn)生一系列不適的反應(yīng)。一般通過病原體培養(yǎng)或血清學(xué)方法進(jìn)行病因查找。酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)是目前檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢測免疫學(xué)指標(biāo)應(yīng)用最廣泛的方法之一，廣泛應(yīng)用于乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒、艾滋病等感染性疾病的診斷檢測和診斷，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速簡便等優(yōu)點(diǎn)，但是一些影響因素不容小覷，臨床待檢標(biāo)本常受溶血、黃疸、脂濁等因素的影響，導(dǎo)致檢測結(jié)果判斷錯(cuò)誤。血清學(xué)也只能確定機(jī)體是否接觸病原體，不判斷是否是現(xiàn)行感染。PCR和基因芯片技術(shù)應(yīng)用于病原微生物的檢測，具有敏感性高、耗時(shí)少、效率高等優(yōu)點(diǎn)。例如：利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測乙肝病毒DNA的載量，與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫法相比，既可以提示疾病的嚴(yán)重程度，也可以監(jiān)測藥物療效、預(yù)后與復(fù)發(fā)。分子診斷學(xué)技術(shù)在感染性疾病的應(yīng)用，可彌補(bǔ)血清學(xué)檢測技術(shù)的缺陷，主要包括以下幾個(gè)方面：(1)檢查不能培養(yǎng)或生長緩慢的病原微生物；(2)通過病原微生物的定量檢查監(jiān)測病情；(3)微生物耐藥性的檢查；(4)細(xì)菌分型及流行病學(xué)調(diào)查。

2.2分子診斷學(xué)技術(shù)在遺傳性疾病中的應(yīng)用遺傳性疾病是指遺傳因素占主要發(fā)病原因的某些疾病，幾乎都存在一定的基因缺失或突變。分子診斷學(xué)技術(shù)是指通過分析患者體內(nèi)遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化，對人體健康狀態(tài)和疾病作出或輔助診斷的方法。分子診斷學(xué)技術(shù)已經(jīng)能夠診斷已知致病基因的遺傳性疾病，對一些基因突變所致的遺傳病也有良好的診斷意義，也能利用遺傳標(biāo)志來診斷一些病因未明的疾病。例如，鐮狀細(xì)胞貧血：β-珠蛋白基因中第6位密碼子的序列由原來的GAG改變?yōu)镚TG，編碼的血紅蛋白為鐮狀細(xì)胞血紅蛋白。通過PCR技術(shù)可以將包含突變位點(diǎn)的β-珠蛋白基因片段擴(kuò)增，根據(jù)產(chǎn)物分析的結(jié)果可以對該遺傳性疾病進(jìn)行診斷?；诨蛐酒夹g(shù)，對基因SNP進(jìn)行分型，檢測遺傳性耳聾基因，發(fā)現(xiàn)50%的兒童期耳聾與遺傳因素有關(guān)。采用序列特異性引物聚合酶反應(yīng)(polymerasechainreac-tionwithsequencespecificprimer,PCR-SSP)技術(shù)對白介素18基因啟動(dòng)子區(qū)-607C/A、-137G/C基因型多態(tài)性進(jìn)行分析，從而發(fā)現(xiàn)該基因啟動(dòng)子區(qū)-607C/A、-137G/C多態(tài)性與江西人群哮喘未見相關(guān)性。利用高通量測序技術(shù)，結(jié)合生物信息學(xué)，可以準(zhǔn)確預(yù)測胎兒發(fā)生某些遺傳性疾病的風(fēng)險(xiǎn)，從而達(dá)到降低畸形兒出生率的目的，例如：21-三體綜合征(唐氏綜合征)、18-三體綜合征(愛德華綜合征)等。

3現(xiàn)狀和挑戰(zhàn)

分子診斷以PCR為基礎(chǔ)，自從發(fā)明以來，廣泛地應(yīng)用于疾病診斷、療效檢測和預(yù)后判斷，有力推動(dòng)了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，開辟了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的新領(lǐng)域，給檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)帶來機(jī)遇與挑戰(zhàn)。在美國和歐洲等發(fā)達(dá)國家，分子診斷已經(jīng)成為了醫(yī)療診斷不可或缺的重要組成部分，為人民的健康保駕護(hù)航發(fā)揮重要的作用。國內(nèi)的分子診斷學(xué)技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，雖取得一定程度的發(fā)展，但是始終落后臨床的發(fā)展，難以滿足臨床診斷的要求，分子診斷項(xiàng)目開展較少，重視程度不夠，應(yīng)用緩慢。以下從兩方面分析我國分子診斷學(xué)技術(shù)應(yīng)用于檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的現(xiàn)狀及存在的問題。

3.1分子診斷檢測平臺(tái)現(xiàn)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展方向是自動(dòng)化和一體化，分子診斷學(xué)技術(shù)努力實(shí)現(xiàn)檢測儀器、試劑和校準(zhǔn)品的一體化，從而避免實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果的差異。我國的分子診斷在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用平臺(tái)，還處在起步階段，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化尚需時(shí)日。目前我國在核酸提取、擴(kuò)增反應(yīng)系統(tǒng)準(zhǔn)備、擴(kuò)增前加樣、上機(jī)、產(chǎn)物和結(jié)果分析等方面仍是以手工操作為主。歐美國家基本上采用自動(dòng)化核酸提取系統(tǒng)，既可以提高工作效率，減少生物暴露時(shí)間，還避免操作人員個(gè)體差異對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高結(jié)果的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。目前我國應(yīng)用于檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的主流分子診斷學(xué)技術(shù)是實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，主要用于感染性疾病病原體核酸的檢測，而歐美發(fā)達(dá)國家，檢測平臺(tái)較為多樣，主流技術(shù)為測序，分子診斷涵蓋了感染性疾病、遺傳性疾病、腫瘤等領(lǐng)域。

3.2技術(shù)人員的水平與能力分子診斷檢驗(yàn)項(xiàng)目質(zhì)量控制涵蓋多個(gè)方面，包括分析前、分析中、分析后的各個(gè)層面，因此對技術(shù)人員、儀器、標(biāo)本、環(huán)境要求更加嚴(yán)格。目前我國對分子診斷學(xué)技術(shù)人員的培訓(xùn)尚不到位，技術(shù)人員在實(shí)驗(yàn)操作、結(jié)果報(bào)告、臨床咨詢方面尚有很多不足之處。隨著人們對人類基因組功能研究的深入，人們對生命、疾病、衰老、死亡的認(rèn)識(shí)更深。分子診斷涉及個(gè)體的基因差異，要求相關(guān)技術(shù)人員能夠提出專業(yè)的意見，指導(dǎo)預(yù)防疾病、降低患病風(fēng)險(xiǎn)，以及實(shí)現(xiàn)個(gè)性化治療等，這就對從事分子診斷學(xué)技術(shù)的工作人員的水平和素質(zhì)提出更高的要求。

4前景和展望

篇(6)

1醫(yī)學(xué)論文的基本要求

1.1創(chuàng)新性醫(yī)學(xué)論文的創(chuàng)新性是指文章要有新意，要發(fā)展醫(yī)學(xué)成就，破解醫(yī)學(xué)問題。醫(yī)學(xué)論文有無創(chuàng)新，選題是關(guān)鍵。選題創(chuàng)新是醫(yī)學(xué)論文寫作的靈魂，是衡量醫(yī)學(xué)論文價(jià)值的重要標(biāo)準(zhǔn)?？审w現(xiàn)在：①理論方面的選題應(yīng)有創(chuàng)新見解，既要反映作者在某些理論方面的獨(dú)創(chuàng)見解，又要提出這些見解的依據(jù)；②應(yīng)用方面的選題應(yīng)有創(chuàng)新技術(shù)等，也就是要寫出新發(fā)明、新技術(shù)、新產(chǎn)品、新設(shè)備的關(guān)鍵，或揭示原有技術(shù)移植到新的醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的效果；③創(chuàng)新性還包括研究方法方面的改進(jìn)或突破。

1.2可行性所謂選題的可行性，是指能夠充分發(fā)揮作者的綜合條件和可以勝任及如期完成醫(yī)學(xué)論文寫作的把握程度。選題切忌好高鶩遠(yuǎn)，脫離實(shí)際，但也不應(yīng)過低，影響主客觀的正常發(fā)揮，降低了醫(yī)學(xué)論文的水平。影響選題的可行性因素有：①主觀條件，包括作者知識(shí)素質(zhì)結(jié)構(gòu)、研究能力、技術(shù)水平及特長和興趣等；②客觀條件，包括經(jīng)費(fèi)、資料、時(shí)間、設(shè)備等。

1.3實(shí)用性撰寫醫(yī)學(xué)論文的目的是為了交流及應(yīng)用。要從實(shí)際出發(fā)，選擇夠指導(dǎo)科研、指導(dǎo)臨床、造福人類的主題，因此，選題的實(shí)用性尤為重要。

1.4科學(xué)性醫(yī)學(xué)論文是臨床和醫(yī)學(xué)科學(xué)研究工作的客觀反映，其寫作的具體內(nèi)容應(yīng)該是取材客觀真實(shí)、主題揭示本質(zhì)、科研設(shè)計(jì)合理、論證科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)、表達(dá)邏輯性強(qiáng)、經(jīng)過實(shí)踐檢驗(yàn)。所以，嚴(yán)格遵守選題的科學(xué)性原則，是醫(yī)學(xué)論文寫作的生命。

1.5前瞻性要選擇有研究價(jià)值及發(fā)展前途的主題，應(yīng)積極開發(fā)研究新領(lǐng)域、新學(xué)科和新理論。

2選題的基本方法

2.1根據(jù)課題研究的結(jié)論來確定主題這是常用的方法，可分為：①以科研的結(jié)論或部分結(jié)論作為醫(yī)學(xué)論文的主題；②科研結(jié)果與開題時(shí)預(yù)測不一致，待查出原因后，再尋找主題；③科研達(dá)不到預(yù)期結(jié)果，可總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，從反面挖掘主題。

2.2在科研過程中選題醫(yī)學(xué)科研的過程中，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)意外的現(xiàn)象或問題，作者如果能夠細(xì)心觀察、及時(shí)發(fā)現(xiàn)，可以在這些偶然中獲得新的選題。

2.3在臨床實(shí)踐中選題臨床工作是醫(yī)學(xué)論文寫作取之不盡的源泉，作者在臨床中會(huì)經(jīng)常遇到許多需要解決的實(shí)際應(yīng)用問題或理論問題，對此，只要從本學(xué)科實(shí)際出發(fā)，用心思考，會(huì)從中產(chǎn)生很多好的主題。其包括：①探討發(fā)病機(jī)制與預(yù)后情況；②分析臨床癥狀與表現(xiàn)；③研究診斷方法和治療方法；④疾病的多因素分析等。

2.4從文獻(xiàn)資料中選題醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)是人們長期積累的寶貴財(cái)富，是醫(yī)學(xué)論文選題的重要來源。閱讀最新文獻(xiàn)資料，可以了解當(dāng)前醫(yī)學(xué)科學(xué)研究的進(jìn)展情況，開拓思路、激發(fā)靈感，從而挖掘提煉出好的醫(yī)學(xué)論文主題。

3醫(yī)學(xué)論文的一般體裁

3.1實(shí)驗(yàn)研究一般為病因、病理、生理、生化、藥理、生物、寄生蟲和流行病學(xué)等實(shí)驗(yàn)研究。主要包括：①對各種動(dòng)物進(jìn)行藥理、毒理實(shí)驗(yàn)，外科手術(shù)實(shí)驗(yàn)；②對某種疾病的病原或病因的體外實(shí)驗(yàn)；③某些藥物的抗癌、抗菌、抗寄生蟲實(shí)驗(yàn)；④消毒、殺蟲和滅菌的實(shí)驗(yàn)。

3.2臨床分析對臨床上某種疾病病例（百例以上為佳）的病因、臨床表現(xiàn)、分型、治療方法和療效觀察等進(jìn)行分析、討論，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，并提出新建議、新見解，以提高臨床療效。

3.3療效觀察指使用某種新藥、新療法治療某種疾病，對治療的方法、效果、劑量、療程及不良反應(yīng)等進(jìn)行觀察、研究，或設(shè)立對照組對新舊藥物或療法的療效進(jìn)行比較，對比療效的高低、療法的優(yōu)劣、不良反應(yīng)的種類及程度，并對是否適于推廣應(yīng)用提出評價(jià)意見。

3.4病例報(bào)告主要報(bào)告罕見病及疑難重癥；雖然曾有少數(shù)類似報(bào)道但尚有重復(fù)驗(yàn)證或加深認(rèn)識(shí)的必要。

3.5病例（理）討論臨床病例討論主要是對某些疑難、復(fù)雜、易于誤診誤治的病例，在診斷和治療方面進(jìn)行集體討論，以求得正確的診斷和有效的治療。臨床病理討論則以對少見或疑難疾病的病理檢查、診斷及相關(guān)討論為主。

3.6調(diào)查報(bào)告在一定范圍的人群里，不施加人工處理因素，對某一疾?。▊魅静?、流行病、職業(yè)病、地方病等）的發(fā)病情況、發(fā)病因素、病理、防治方法及其效果進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查研究，給予評價(jià)，并對防治方案等提出建議。

篇(7)

關(guān)鍵詞：醫(yī)學(xué)教育研究；文獻(xiàn)分析；合作度；參考文獻(xiàn)

《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》是醫(yī)學(xué)教育專業(yè)研究領(lǐng)域最重要的交流平臺(tái)和信息來源[1]。在1994年，作者曾對該刊（當(dāng)時(shí)為《醫(yī)學(xué)教育》）1986～1992年83期發(fā)表的全部論文的論文作者合作度、論文作者單位合作度進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)與分析[2]。時(shí)隔25年（1986～2010），《醫(yī)學(xué)教育》雜志已經(jīng)更名為《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》，近年更是進(jìn)入到中文核心期刊范疇[3]。為了反映期刊論文作者合作度在新形勢下出現(xiàn)了哪些變化，本文對《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》2008～2010年3卷18期雜志的論文作者合作度再次進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并與25年前資料進(jìn)行對比。

1資料與方法

1.1一般資料 為《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》2008，2009，2010共3卷18期雜志全部論文。

1.2統(tǒng)計(jì)方法 對統(tǒng)計(jì)對象以篇為單位分別逐條統(tǒng)計(jì)，包括各期雜志論文篇數(shù)、每篇論文的作者數(shù)以及涉及的作者單位，最后求出論文作者合作度以及論文作者單位合作度。再與既往資料對比分析。

2結(jié)果

參見表1、表2、表3。另統(tǒng)計(jì)了《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》論文作者涉獵的學(xué)科以及分類，按照來源期刊可分為7個(gè)類別：醫(yī)學(xué)教育、醫(yī)學(xué)專業(yè)期刊、普通教育學(xué)、醫(yī)學(xué)院校學(xué)報(bào)、普通大專院校學(xué)報(bào)、科學(xué)技術(shù)類和社會(huì)科學(xué)經(jīng)濟(jì)文學(xué)類等。

3討論

3.1論文作者署名人數(shù)構(gòu)成以及論文作者單位數(shù)量構(gòu)成均較25年前發(fā)生了明顯變化：2008～2010年度《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》論文作者署名人數(shù)主要集中在2～5位，單一作者發(fā)表的論文由61.46%改變?yōu)?1.29%；而論文作者單位數(shù)量構(gòu)成也由單一單位占94.94%降低為61.09%，而由2～3個(gè)單位間合作的論文數(shù)量由4.83%大幅增加到34.16%。

3.2論文作者合作度與論文作者單位合作度明顯提高，論文作者合作度由1.69改變?yōu)?.81；論文作者單位合作度也由1.06增加到1.61。

3.3《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》論文作者合作度增加的意義 根據(jù)論文作者署名人數(shù)構(gòu)成的變化（單一作者數(shù)量比例的大幅下降），論文作者單位數(shù)量構(gòu)成發(fā)生的變化（多單位合作的論文數(shù)量大幅增加），結(jié)合論文作者合作度與論文作者單位合作度均較25年前明顯提高的結(jié)果，反映了近年醫(yī)學(xué)教育工作者的研究廣度在明顯增加。醫(yī)學(xué)教育工作者研究廣度的增加，必然會(huì)有深度的體現(xiàn)。醫(yī)學(xué)教育是教育學(xué)與醫(yī)學(xué)兩大體系的綜合體，醫(yī)學(xué)專業(yè)的特殊性與教育學(xué)的普遍性如何結(jié)合，是需要醫(yī)學(xué)教育工作者不斷去體會(huì)與努力地。

3.4醫(yī)學(xué)教育工作者在掌握本專業(yè)知識(shí)的同時(shí)，需要不斷地?cái)U(kuò)大知識(shí)面、涉獵面要廣 在提供參考文獻(xiàn)的773種中文雜志中，共提供中文參考文獻(xiàn)3596條，其中19種醫(yī)學(xué)教育專業(yè)期刊共提供引文條數(shù)1476條，即2.46 9%（19/773）的醫(yī)學(xué)教育專業(yè)期刊提供了41.05%（1476/3596）的中文參考文獻(xiàn)。其次為醫(yī)學(xué)專業(yè)期刊與普通教育學(xué)期刊，分別提供26.06%與16.18^%的中文參考文獻(xiàn)，但兩者涉及到的期刊種類分別達(dá)到270種與132種。由此可見，醫(yī)學(xué)教育工作者除了專業(yè)知識(shí)以外，尚需掌握醫(yī)學(xué)教育學(xué)的相關(guān)知識(shí)，同時(shí)也需要熟悉普通教育學(xué)知識(shí)，了解社會(huì)科學(xué)知識(shí)、科普知識(shí)。

參考文獻(xiàn)：

[1]李曉霞，耿民建，甘業(yè)華，等.《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》2002年至2006年載文被引分析[J].中華醫(yī)學(xué)教育雜志，2008，28（4）：126-128.

[2]張東海，田華.醫(yī)學(xué)教育研究的廣度與深度亟待增強(qiáng)--《醫(yī)學(xué)教育》雜志論文作者合作度分析[J].中國科學(xué)技術(shù)出版社，1994：430-432.

[3]《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》編輯部.中華醫(yī)學(xué)教育雜志》入選"中國科技論文統(tǒng)計(jì)源期刊"[J].中華醫(yī)學(xué)教育雜志，2010，30（6）：853.

[4]李曉霞，耿民建，甘業(yè)華.《中華醫(yī)學(xué)教育雜志》不同時(shí)期狀況的比較分析[J].中華醫(yī)學(xué)教育雜志，2009，29（5）：59-62.